צוות מחקר פיתח בדיקת אימונו של זרימה צידית בתיווך גישור רב-אתרי (mbLFIA) המאפשר זיהוי רגיש מאוד ונייד של וירוסים הנישאים על ידי יתושים, תוך שימוש בנגיף Chikungunya (CHIKV) כמטרה מודל. על ידי עיצוב מחדש של מוצרי הגברה של חומצות גרעין ליצירת אתרי גישור מרובים ושילוב אסטרטגיה זו עם שיפור קולורימטרי מבוסס ננו-חלקיקי gold@platinum, השיטה השיטה מגבלת זיהוי ויזואלית נמוכה כמו 2 pmol·L−1 עבור CHIKV. העבודה מציעה פלטפורמת אבחון מבטיחה לבדיקות שדה מהירות, מעקב אחר התפרצויות ובקרת זיהומים, במיוחד באזורים מוגבלים במשאבים שבהם קשה לגשת למכשירי מעבדה קונבנציונליים.
וירוסים הנישאים על ידי יתושים, כולל CHIKV, וירוס דנגי, וירוס זיקה, וירוס קדחת צהובה, וירוס דלקת המוח היפנית, וירוס הנילוס המערבי ו-Getah, ממשיכים להוות איומים הולכים וגדלים על בריאות הציבור, שכן נסיעות בינלאומיות, סחר והתרחבות וקטור הקשורה לאקלים מגבירים את סיכוני ההעברה. בדיקת חומצות גרעין מספקת דיוק גבוה מכיוון שהיא מזהה רצפי גנים ויראליים מהותיים ויכולה לעזור להבחין בין גרסאות ויראליות. עם זאת, שיטות בשימוש נרחב כגון תגובת שרשרת פולימראז תעתוק הפוכה (RT-PCR), הגברה איזותרמית בתיווך תעתוק לולאה, הגברה של מעגל מתגלגל ומבחנים מבוססי CRISPR תלויים לעתים קרובות באנזימים, מחזוריות תרמית, קוראי פלואורסצנטי או ציוד מיוחד אחר. מבחני זרימה לרוחב מבוססי מכלול סיכות קטליטי קיימים שיפרו את הניידות, אך הרגישות שלהם מוגבלת על ידי המספר הקטן של אתרים הזמינים לגישור בדיקות קולורימטריות לקו הבדיקה. מגבלות אלו מדגישות את הצורך בפלטפורמה פשוטה יותר, רגישה יותר, נטולת אנזימים המתאימה לזיהוי ויראלי באתר.
מחקר (DOI: 10.48130/targetome-0026-0016) שפורסם ב טרגטום ב-30 באפריל 2026 על ידי הצוות של Yanmin Ju, China Pharmaceutical University, מדווח על אסטרטגיית mbLFIA נטולת אנזים שמחזקת אותות רצועת בדיקה באמצעות גישור מולקולרי רב-אתרי ותצהיר צבע מזורז של ננו-חלקיקים Au@Pt.
החוקרים תכננו תחילה מערכת מכלול סיכות קטליטי (CHA) דו-עגולים הכוללת ארבעה בדיקות סיכות ראש, H1, H2, H3 ו-H4. כאשר CHIKV יעד RNA קיים, הוא מפעיל הכלאה בין H1 ל-H2, משחרר את המטרה כדי להתחיל מחזורי הגברה נוספים. קומפלקס H1H2 שנוצר מפעיל לאחר מכן את H3 ו-H4 ליצירת מוצרי הכלאה של H3H4. בניגוד למוצרים רגילים עם אתרי גישור מוגבלים, מוצרי H3H4 תוכננו עם מספר אתרי קישור מקבילים, המאפשרים להם לחבר בדיקות Au@Pt-DNA לקו הבדיקה באמצעות שני מנגנוני גישור. עיצוב זה הגדיל באופן ניכר את האות הקולורימטרי: בריכוז מוצר נמוך, המבנה הרב-אתרי הפיק אות פי 10.8 ופי 9.6 חזק יותר משני עיצובים באתר מוגבל. לאחר מכן, הצוות סינתז ננו-חלקיקים Au@Pt, אישר את המבנה וההרכב שלהם באמצעות מיקרוסקופיה אלקטרונית תמסורת, ספקטרוסקופיה פוטואלקטרון של רנטגן, עקיפה של קרני רנטגן וניתוחים קשורים, והדגים את הפעילות הקטלטית החזקה דמוית הפראוקסידאז שלהם. ננו-חלקיקים אלה זירזו את החמצון של 3-אמינו-9-אתיל-קרבזול (AEC), ויצרו משקע חום-אדום בלתי מסיס על קו הבדיקה והגביר עוד יותר את הקריאה החזותית. לאחר אופטימיזציה של טמפרטורת התגובה, יחסי סיכת ראש, זמן תגובה, נפח בדיקה, ריכוז AEC, ריכוז מי חמצן וזמן שיפור, הבדיקה הראתה טווח זיהוי ויזואלי בין 2 ל-10⁴ pmol·L−1 לאחר שיפור קולורימטרי, בהשוואה ל-20 עד 10⁴ pmol·L−1 עבור הבדיקה הכללית. בדיקות ספציפיות הראו שאות ה-CHIKV היה חזק יותר באופן משמעותי מאותות מ-ZIKV, DENV, WNV, YFV, JEV ו-GETV. במטריצות סרום, רוק ושתן ספיקים, שיעורי ההחלמה נותרו בטווח של 80%-120%, מה שמצביע על סבילות טובה לדגימות ביולוגיות. לבסוף, ב-36 דגימות סרום של עכבר CHIKV חשודות, mbLFIA זיהתה 16 חיוביים ו-20 שליליים, תוך התאמת תוצאות RT-PCR עם 100% התאמה, רגישות וסגוליות.
מחקר זה מספק אסטרטגיה חדשה לחיזוק אותות מבחני זרימה רוחבית על ידי הגדלת המספר והיעילות של אירועי גישור מולקולריים. על ידי שילוב של הגברה CHA נטולת אנזים, מוצרי הכלאה מרובי-אתרים ותצהיר AEC בסיוע ננוזים, הפלטפורמה משפרת את הרגישות החזותית ללא צורך במכשירים מורכבים. החוקרים מציעים ש-mbLFIA יכולה לתמוך בזיהוי מהיר של וירוסים הנישאים על ידי יתושים במרפאות, נמלים, תחנות שדה ואזורים דלי משאבים, ועשויה להיות מותאמת ליישומים רחבים יותר של בדיקת חומצות גרעין במעקב אחר מחלות זיהומיות.
