מחקר מזהה את כלורציקליזין כטיפול פוטנציאלי להפחתת הצטברות פרוטופורפירין-IX ונזק לכבד במודלים ניסיוניים של EPP.
לִלמוֹד: מסלול ההיסטמין הוא מטרה לטיפול פרוטופורפיריה אריתרופואטית נסיונית בכבד. קרדיט תמונה: luchschenF/Shutterstock.com
במחקר שפורסם לאחרונה ב- סלולרי ומולקולרי גסטרואנטרולוגיה והפטולוגיהקבוצת חוקרים העריכה את תפקידו של מסלול ההיסטמין בהצטברות פרוטופורפירין-IX (PP-IX) והעריכה את הפוטנציאל הטיפולי של כלורציקליזין ואנטי-היסטמינים לטיפול במחלת כבד בפרוטפורפיריה אריתרופואטית (EPP) (הפרעה גנטית הגורמת להצטברות PP-IX , מה שמוביל לרגישות לאור).
רֶקַע
EPP נובע מפעילות מופחתת של ferrochelatase, הגורם להצטברות PP-IX בכבד ומבשרי אריתרואידים. בעוד שרגישות לאור בעור היא התסמין העיקרי, 10-25% מהחולים מפתחים תפקוד לקוי של הכבד, כאשר 1-4% מתקדמים לאי ספיקת כבד סופנית הדורשת השתלה.
הטיפולים הנוכחיים מקלים על תסמיני העור אך אינם מצליחים לטפל במחלות כבד, ומשאירים פער טיפולי קריטי. היסטמין ותאי מאסט היו מעורבים בפתולוגיה של הכבד, מה שמצביע על מטרות התערבות חדשות.
מחקר נוסף חיוני כדי לחקור את התפקיד המכניסטי של מסלול ההיסטמין והפוטנציאל שלו לפיתוח טיפולים ממוקדים למחלת כבד הקשורה ל-EPP.
לגבי המחקר
במחקר הנוכחי, השיטות כללו בדיקת תרופות בתפוקה גבוהה באמצעות מודל של דג זברה לזיהוי תרכובות המפחיתות הצטברות PP-IX. לזחלי דג הזברה מהונדסים הוזרקו חומצה δ-aminolevulinic (ALA) ודפרוקסאמין (DFO), מה שגרם לייצור יתר של PP-IX.
הדמיית פלואורסצנציה שימשה להערכת רמות PP-IX בכבד, מה שהוביל לזיהוי של כלורציקליזין (CCZ) כתרכובת מבטיחה.
מחקרי אימות נערכו בהפטוציטים ראשוניים של עכברים שטופלו ב-ALA וב-DFO ובשני דגמי עכברים של EPP- המוטנט Ferrochelatase 1 עם אילן יוחסין של עכברי Pas (Fechm1Pas) ועכברים שניזונו בתזונה פורפירינוגנית המכילה 3,5-diethoxycarbonyl-1, 4-דיהידרוקולידין (DDC).
רמות הפלזמה, הכבד והצואה PP-IX נמדדו באמצעות פלואורסצנטי, וניתוח היסטולוגי העריך את מורפולוגיה של הכבד. טרנסלוקציה גרעינית של קולטני מפתח חומצת מרה, כולל קולטן אנדרוסטן מכונן וקולטן פארנסואיד-X, נותחה, יחד עם הביטוי של טרנספורטרים לסילוק PP-IX.
ניסויי נוק-דאון המכוונים למשאבת ייצוא מלח מרה (BSEP) וחלבון-4 (MRP4) הקשור לעמידות רב-תרופות, חקרו תפקידי טרנספורטר בטיפול ב-PP-IX.
המחקר חקר עוד יותר את פעילות קולטן היסטמין (H) תוך שימוש באנטי-היסטמינים, תוך הערכת השפעתם על רמות PP-IX וצבירת חלבון.
הנתונים נותחו סטטיסטית כדי לאשר את היעילות של CCZ בהורדת PP-IX והקלה על נזקי כבד הקשורים ל-EPP, תוך הדגשת הערך הטיפולי הפוטנציאלי של אנטיהיסטמינים.
תוצאות המחקר
התוצאות חשפו כי CCZ מפחית ביעילות את הצטברות PP-IX במספר מודלים ניסיוניים של EPP. בדג הזברה, CCZ הפחית משמעותית את הקרינה של PP-IX בכבד והגבירה את הפרשתו למדיום שמסביב. באופן דומה, טיפול ב-CCZ בהפטוציטים ראשוניים של עכברים הוביל להפחתה תלוית מינון ברמות ה-PP-IX התוך תאי, המאשר את יעילותו במבחנה.
בעכברי Fechm1Pas, מתן CCZ הביא להפחתה ניכרת של משקעי PP-IX בכבד, במיוחד משקעים בינוניים, בעכברים נקבות. התרכובת גם הורידה את רמות PP-IX בכבד, אריתרוציטים ומח העצם של נקבות עכברים תוך קידום הפרשת צואה של PP-IX.
סמנים ביולוגיים בפלזמה של פגיעה בכבד, כגון אלנין אמינוטרנספראז (ALT) ופוספטאז אלקליין (ALP), הופחתו גם הם בעקבות טיפול ב-CCZ בעכברים נקבות. עם זאת, עכברים זכרים לא הפגינו הפחתות דומות, מה שמצביע על תגובה ספציפית למין.
CCZ נבדק עוד בעכברים שניזונו DDC, מודל תרופתי של EPP. עכברים נקבות הפגינו הצטברות PP-IX גבוהה יותר מאשר זכרים, מה שעולה בקנה אחד עם ממצאים קודמים. CCZ הפחית ביעילות את רמות ה-PP-IX בכבד והפחית את הפגיעה בכבד אצל נקבות אך לא אצל גברים.
השפעות אלו נמצאו בקורלציה עם ירידה בחמצון ובהצטברות החלבון, דבר המצביע על שיפור בתגובות הלחץ הסלולרי.
היסטמין זוהה כגורם פרו-פורפירינוגני בהפטוציטים. חסימת קולטני H1 ו-H2 הוכחה כמפחיתה את רמות ה-PP-IX. טיפול CCZ הפחית את חדירת תאי התורן בכבד ואת רמות ההיסטמין, עם השפעות בולטות יותר שנצפו בעכברים נקבות.
הממצאים מצביעים על כך שהיסטמין ומסלולי האיתות שלו ממלאים תפקיד קריטי בהצטברות PP-IX ופתולוגיית כבד הקשורה ל-EPP.
מחקרים מכניסטיים נוספים גילו ש-CCZ גרמה לטרנסלוקציה גרעינית של קולטן אנדרוסטן מכונן (CAR) וקולטן פרנסואיד X (FXR), תוך שיפור הביטוי של טרנספורטר חומצת מרה, כולל MRP4 ו-BSEP.
מסלול זה כנראה מקל על פינוי PP-IX באמצעות הפרשת מרה. ניסויי נוק-דאון של MRP4 ו-BSEP אישרו את תפקידם בהפחתת צבירת חלבון הקשורה ל-PP-IX.
מַסְקָנָה
לסיכום, רק אמלנוטיד (SCENESSE®), אנלוגי הורמון מגרה α-מלנוציטים, אושר ל-FDA (FDA) לטיפול בתסמיני עור ב-EPP, מה ומותיר סיבוכי כבד ללא טיפול. CCZ, אנטיהיסטמין H1, זוהה באמצעות בדיקת תרופות כמפחית PP-IX חזק.
CCZ הפחית את רמות PP-IX והקלה על פציעת כבד במודלים ניסיוניים נשיים על ידי גרימת הפרשת מרה באמצעות הפעלה של מסלולי CAR/MRP4 ו-FXR/BSEP. זה גם עיכב הצטברות PP-IX בתיווך היסטמין, הפחתת צבירה של חלבון ולחץ חמצוני.
ממצאים אלו מצביעים על כך ש-CCZ ואנטי-היסטמינים אחרים מחזיקים בהבטחה כטיפול בטוח ויעיל למחלת כבד הקשורה ל-EPP.