במחקר שפורסם לאחרונה ב- תָאקבוצת חוקרים חקרה חומצה אולאית (OA) כטיפול פוטנציאלי לעיכוב לקטובצילוס אינרס (ל' אינרס) ולקדם לקטובצילוס קריספטוס (ל. קריספטוס) דומיננטיות בנרתיק חיידקי (BV).
רֶקַע
מיקרוביוטה ספציפית של מערכת איברי המין הנשית (FGT) קשורה לתוצאות בריאותיות שליליות, כולל אי פוריות, לידה מוקדמת וזיהומים כמו נגיף הכשל החיסוני האנושי (HIV). BV, הקשורה לתוצאות אלו, משפיעה על עד 58% מהנשים ברחבי העולם ומסומנת על ידי מחסור בלקטובצילים ודומיננטיות של חיידקים אנאירוביים.
טיפול אנטיביוטי סטנדרטי עם מטרונידזול מוביל לעיתים קרובות להישנות, אולי עקב מעבר לכיוון L.iners בִּמקוֹם ל. קריספטוס, מה שקשור לתוצאות בריאותיות טובות יותר. יש צורך במחקר נוסף כדי לאמת את היעילות והבטיחות של OA כטיפול ממוקד לקידום ל. קריספטוס דומיננטיות ומניעת הישנות BV.
לגבי המחקר
המחקר הנוכחי חקר עיכוב, שיפור והרג של גדילת חיידקים באמצעות ניסוחים ותוספים שונים של מדיה. מבודדי חיידקים התעוררו לתחייה על מדיה מוצקה, עם תרביות סטרטר שגודלו במדיה נוזלית במשך 48 שעות. הצפיפות האופטית ב-600 ננומטר (OD600) נמדדה, ותרביות הודללו לפי 40 מה-OD600 ההתחלתי עבור ניסויים. שיפור הצמיחה כלל פילינג ושטיפת תרבויות סטרטר כדי למנוע העברה של חומרים מזינים לפני חיסון.
עבור פעילות קוטל חיידקים, בדיקת ריכוז קוטל חיידקים מינימלית (MBC) העריכה את השפעות OA, כאשר יחידות יוצרות מושבות (CFU) נספרו לאחר 48-72 שעות. תחרות וניסויים קהילתיים מדומה כללו ערבוב זני חיידקים ביחסים מוגדרים, חיסון שלהם לתנאי מדיה שונים, ומדידת טיטר CFU ו-16S ריבוזום חומצה ריבונוקלאית (rRNA) רצף לאחר 48 או 72 שעות.
הדמיה במיקרוסקופ אלקטרונים (TEM) בדקה מבנים חיידקיים לאחר טיפול ב-OA. מבחני שחרור אדנוזין טריפוספט (ATP) כימתו את ההשפעה של OA על רמות ATP של חיידקים. רצף RNA ניתח ביטוי גנים בזני לקטובצילוס שטופלו ב-OA. Lipidomics ומעקב איזוטופי חקרו שינויים מטבוליים בתרבויות שטופלו ב-OA שכותרתו. נוק-אאוט של גנים ב-Lactobacillus gasseri נוצר ואומת באמצעות בניית פלסמיד ורצף גנום שלם. אפיון מוצר אנזימים וליפידומיקה ממוקדת ניתחו את חילוף החומרים של חומצות שומן וחומצות שומן עם הידרוקסילציה בדגימות שטיפה בצוואר הרחם, כאשר רצף rRNA 16S קובע את הרכב המיקרוביוטה.
תוצאות המחקר
לחומצות שומן ארוכות שרשרת בלתי רוויות Cis-9 (cis-9-uLCFAs) יש השפעות ברורות על מינים שונים של לקטובצילוס ב-FGT. בתרבית עם cis-9-uLCFAs, כולל OA, חומצה לינולאית (LOA) וחומצה פלמיטולאית (POA), ל' אינרס היה מעוכב באופן משמעותי, בעוד L. gasseri, L. crispatus, L. jensenii, ו L. mulieris הפגין מעט עכבות. עיכוב סלקטיבי זה של ל' אינרס אושרה על פני זנים וסוגי מדיה מרובים, כאשר OA מציגה השפעה חיידקית על ל' אינרס בריכוז של 400 מיקרומטר. לעומת זאת, מיני לקטובצילוס שאינם בעלי חיים לא היו עמידים רק לחומצות שומן אלו, אלא גם חוו צמיחה מוגברת כשהוסיפו להם OA.
ניתוח טראנסקריפטומי גילה כי מיני לקטובצילוס שאינם בעלי חיים חולקים קבוצה משומרת של גנים, כולל oleate hydratase (ohyA) ומשאבת פליטת חומצות שומן (farE), אשר נעדרים ב ל' אינרס. נוכחותם של גנים אלו במינים שאינם בעלי חיים, מאפשרת להם לבצע חילוף חומרים ולסילוק רעלים של cis-9-uLCFAs, מה שמקנה יתרון תחרותי בסביבות עשירות בחומצות שומן אלו. מחקרים גנומיים ואנזימטיים נוספים אישרו שאנזימי OhyA בלקטובצילוס שאינם מכילים פעילים פונקציונלית, מה שמאפשר למינים אלו לנצל OA לסינתזה וצמיחה של ממברנות.
לעומת זאת, ל' אינרס, שחסרים את הגנים המגנים הללו, רגישים לשיבוש ממברנה ולמוות של תאים כאשר הם נחשפים ל-cis-9-uLCFAs. המחקר מצא גם כי חומצה 10-hydroxystearic (10-HSA), מטבוליט המיוצר על ידי OhyA, יכולה לשפר עוד יותר את הצמיחה של מיני לקטובצילוס שאינם בעלי חיים תוך עיכוב ל' אינרס.
מסקנות
לסיכום, מחקר זה מדגיש הבדלים ספציפיים למין במטבוליזם של חומצות שומן בין מיני לקטובצילוס ב-FGT, וחושף אסטרטגיות טיפוליות פוטנציאליות עבור BV. cis-9-uLCFAs כמו OA, מעכבים באופן סלקטיבי ל' אינרס וחיידקים מסוימים הקשורים ל-BV תוך קידום צמיחה של מינים מועילים כגון ל. קריספטוס. היעדר גנים מרכזיים (ohyA ו-farE) ב ל' אינרס הופך אותו לרגיש ל-OA, בעוד שמיני לקטובצילוס שאינם בעלי חיים משתמשים בגנים אלה כדי להתנגד ל-OA ולהמיר אותו לצמיחה. ממצאים אלו מצביעים על כך שגישות המבוססות על מטבוליטים יכולות לשפר את הטיפול ב-BV על ידי העדפה ל. קריספטוס שְׁלִיטָה.
