במחקר שפורסם לאחרונה ב- כתב העת הבינלאומי למדעים מולקולרייםקבוצת חוקרים העריכה את היעילות של תמצית פוליפנול תפוחים 'לימונצ'לה' (LAPE) בהפחתת מחלת מעי דלקתית (IBD) הנגרמת על רעילות כבד באמצעות תכונות נוגדות החמצון והאנטי דלקתיות שלה במודל של עכבר דיניטרו-בנזן-סולפוני (DNBS)-קוליטיס .
מחקר: תמצית עשירה בפוליפנולים מזן התפוחים 'לימונצ'לה' משפרת את קוליטיס הנגרמת על ידי חומצה סולפונית של דיניטרובנזן ונזק לכבד. קרדיט תמונה: מרסין רוגוזינסקי / Shutterstock
רקע כללי
IBD כמו מחלת קרוהן (CD) וקוליטיס כיבית (UC) מובילים לדלקת עיכול מתמשכת, ולמעלה מ-35% מהחולים סובלים מביטויים מחוץ למעיים (EIM), מה שמחמיר את איכות חייהם. EIMs אלה כוללים בעיות מפרקים, עור ועיניים, עם כולנגיטיס טרשתית ראשונית כסיבוך כבד נפוץ. החיבור של מערכת העיכול למערכת הכבד והרב חושף את הכבד לדלקת הנגרמת בקוליטיס. חדירות מוגברת של המעי ב-IBD מאפשרת לפלורת המעיים לנדוד אל הכבד, ולגרום לדלקת ולנזק. פוליפנולים הראו הבטחה בטיפול בבעיות אלו בשל תכונותיהם נוגדות החמצון, האנטי דלקתיות והורדת שומנים בדם. יש לציין כי פוליפנולים תפוחים של Limoncella הוכיחו יעילות בהפחתת נזק כבד הנגרם כתוצאה מקוליטיס, מה שמצריך מחקר נוסף כדי להבהיר את המנגנונים והפוטנציאל שלהם בטיפול IBD אנושי.
לגבי המחקר
כימיקלים כמו DNBS, myeloperoxidase (MPO) וריאגנטים אחרים הגיעו מספקים בעלי מוניטין, מה שמבטיח טוהר גבוה למחקר. לצורך החקירה של LAPE, תפוחים נקטפו מ-Castelvetere del Calore, איטליה, ועובדו בשיטה הכוללת מתנול כדי לחלץ את הפוליפנולים, אשר נותחו לאחר מכן באמצעות כרומטוגרפיה נוזלית בעלת ביצועים גבוהים (HPLC) כדי לזהות את התוכן הפוליפנולי.
עכברי CD1 זכרים שוכנו בתנאים מבוקרים למודל הניסוי כדי להבטיח את שלומם. המחקר פעל לפי הנחיות אתיות, באישור הרשויות הרלוונטיות. קוליטיס נגרמה בעכברים אלה באמצעות DNBS, ו-LAPE ניתנה כדי להעריך את הפוטנציאל הטיפולי שלה. ריכוזים שונים של LAPE נבדקו כדי להעריך את השפעתו על דלקת המעי הגס וסמני נזק לכבד. חדירות המעיים נמדדה באמצעות דקסטרן מצומד עם פלואורססאין איזותיוציאנט (FITC), בעוד מבחני פעילות MPO ומדידות ייצור ציטוקינים סיפקו תובנות לגבי התגובה הדלקתית.
ניתוח היסטולוגי של רקמות המעי הגס והכבד, יחד עם הערכת סמנים ביוכימיים בסרום, הציעו הבנה נוספת של ההשפעות המגנות של LAPE מפני נזק שנגרם כתוצאה מהקוליטיס. ממצאי המחקר נותחו בקפדנות, תוך שימוש בשיטות סטטיסטיות כדי להבטיח את מהימנות התוצאות, והצביעו על היתרונות הפוטנציאליים של LAPE בטיפול במצבים דלקתיים וסיבוכים שלהם.
תוצאות המחקר
המחקר הנוכחי ניתח את ההרכב הפוליפנולי של LAPE באמצעות HPLC-Diode-Array Detection (DAD), וחשף כמויות משמעותיות של חומצה גאלית, פרוציאנידין B1, קטכין, חומצה כלורוגנית ופוליפנולים אחרים, מה שמצביע על פרופיל פוליפנולי עשיר המועיל לבריאות. בניסויים באמצעות מודל DNBS של קוליטיס בעכברים, LAPE הראה תכונות אנטי דלקתיות מבטיחות על ידי שיפור נזק מקרוסקופי והיסטופתולוגי שנגרם על ידי DNBS. יש לציין כי מתן LAPE הוביל להפחתה משמעותית ביחס משקל/אורך המעי הגס, אינדיקטור לדלקת, ושיפור סימנים היסטולוגיים של פגיעה במעי הגס, כגון אובדן קריפטה וחדירת תאים דלקתיים.
חקירה נוספת של ההשפעות האנטי-דלקתיות של LAPE גילתה ירידה משמעותית בחדירת נויטרופילים, כפי שנמדדה על ידי פעילות MPO, והפחתה בציטוקינים הפרו-דלקתיים interleukin (IL)-1β ו-IL-6 במעי הגס של עכברים שטופלו ב-DNBS. ממצאים אלה מדגישים את הפוטנציאל של LAPE בוויסות תגובות דלקתיות בתוך המעי.
יתרה מכך, תפקידה של LAPE בשיקום תפקוד מחסום המעי הודגש על ידי יכולתו להפחית באופן משמעותי את חדירות המעי המוגברת בעכברים שטופלו ב-DNBS, כפי שהצביעו על רמות נמוכות יותר של FITC-dextran בסרום. המחקר גם מצא שטיפול ב-LAPE עזר לשמור על רמות β-catenin על קרום התא, שהוא חיוני להידבקות התא ולשמירה על שלמות מחסום המעי.
המחקר התרחב לבחינת ההשפעה של LAPE על תפקוד לקוי של הכבד והצטברות שומנים הקשורים לקוליטיס. קוליטיס הנגרמת על ידי DNBS גרמה לעלייה באנזימי כבד בסרום כמו Alanine Aminotransferase (ALT) ו-Aspartate Aminotransferase (AST) ולהגברת החמצן של שומנים, המעיד על נזק לכבד ולחץ חמצוני. למרבה הפלא, מתן LAPE הפחית משמעותית את ההשפעות הללו, והוכיח את תפקידו המגן מפני הפרעות בתפקוד הכבד ולחץ חמצוני. הערכות היסטולוגיות תמכו עוד יותר ביעילות של LAPE, והראו הצטברות מופחתת של שומנים בכבד ושיפור ההיסטופתולוגיה של הכבד בעכברים שטופלו ב-DNBS.
מסקנות
לסיכום, IBDs כמו UC ו-CD גורמים לדלקת כרונית במערכת העיכול, שעלולה להוביל לנזק לכבד. הטיפולים הנוכחיים, הקשורים לעתים קרובות לתופעות שליליות, מדגישים את הצורך בחלופות בטוחות יותר. מחקר זה מתמקד ב
LAPE, מדגים את יעילותו בהפחתת דלקת מעיים וכבד במודל קוליטיס המושרה על ידי DNBS בעכברים. LAPE לא רק הקל על דלקת המעי הגס על ידי הפחתת סמנים דלקתיים ושיפור הנזק ההיסטולוגי, אלא גם שיפר את תפקוד מחסום המעי, פוטנציאלי באמצעות אפנון של מסלול האיתות Wnt/β-catenin. בנוסף, זה הפחית את הנזק לכבד, המעיד על רמות נמוכות יותר של אנזימי כבד והפחתת הצטברות שומנים, ככל הנראה באמצעות עיכוב מסלול ה- Nuclear Factor kappa-light-enhancer של תאי B פעילים (NF-κB). הממצאים מצביעים על כך שצריכה יומית קטנה של תפוחי לימונצ'לה יכולה להיות מועילה לחולי IBD, ומציעה גישה טבעית להפחתת דלקת מעיים וכבד כאחד.
