במחקר שפורסם לאחרונה ב-Nature Medicine, החוקרים העריכו את הבטיחות והיעילות של טיפול בווירוס 1 (AAV1)-human otoferlin (hOTOF) בבינאורלי בחמישה ילדים עם חירשות אוטוזומלית רצסיבית 9 (DFNB9).
לימוד: טיפול גנטי דו-צדדי בילדים עם חירשות אוטוזומלית רצסיבית 9: תוצאות ניסוי בזרוע אחת. קרדיט תמונה: GUNDAM_Ai/Shutterstock.com
רקע כללי
מיליוני אנשים ברחבי העולם סובלים מאובדן שמיעה כתוצאה מהפרעות בגן OTOF, הגורמות ל-DFNB9.
ריפוי גנטי הוא אפשרות טיפול מעשית לחירשות תורשתית, כאשר מחקרים מצביעים על כך שטיפול גנטי חד-צדדי AAV1-hOTOF בטוח וקשור ליתרונות תפקודיים.
שיקום שמיעה דו-צדדי עשוי לספק יתרונות נוספים, כגון שיפור תפיסת הדיבור ולוקליזציה של מקור הקול. עם זאת, נוגדנים מנטרלים קיימים נגד AAV יכולים למנוע זיהום המושרה על ידי וקטור AAV בתאי מטרה וברקמות, וכתוצאה מכך לרעילות חיסונית ולהגבלת משלוח חוזר.
לגבי המחקר
המחקר הנוכחי בדק האם טיפול גנטי בינאורלי AAV1-hOTOF בטוח ויעיל בחולי DFNB9.
החוקרים העריכו 316 מתנדבים לזכאות, מתוכם לחמישה ילדים (שלושה בנים ושתי בנות) הייתה לקות שמיעה מולדת בשתי האוזניים כתוצאה ממוטציות בגן OTOF ביאללי שנרשמו בין ה-14 ביולי ל-15 בנובמבר 2023.
למשתתפים היו מוטציות בגנים OTOF ורמות תגובת גזע מוח שמיעתי (ABR) של ≥65 dB בשתי האוזניים. קריטריוני ההדרה כללו יחס של נוגדנים מנטרלים ל-AAV1>1:2,000, מחלה אוטולוגית קיימת, היסטוריה של שימוש בסמים, כשל חיסוני מורכב או השתלת איברים, היסטוריה של הפרעות נוירולוגיות או פסיכיאטריות, והיסטוריה של הקרנות וכימותרפיה.
במהלך הניתוח החד-פעמי, החוקרים הזריקו 1.50×1012 גנומים וקטורים (vg) של AAV1-hOTOF לתוך השבלול הדו-צדדי של המטופל דרך החלון העגול של האוזן.
בהשוואה לזריקה חד צדדית, הזרקה דו צדדית הגדילה את זמן הניתוח פי שניים. הם העריכו את שלושת החולים הראשונים במשך 26 שבועות ואת השניים הנותרים במשך 13 שבועות.
התוצאה העיקרית הייתה רעילות מגבילת מינון לאחר שישה שבועות, בעוד שנקודות הסיום המשניות היו בטיחות (תופעות לוואי) ויעילות (תפקוד שמיעתי ותפיסת דיבור). המחקר חקר יתרונות נוספים של טיפול אוזניים דו-צדדי עבור חולי DFNB9 בסביבות רועשות ולוקליזציה של מקור קול.
דרגת הרעילות נקבעה באמצעות קריטריונים נפוצים לטרמינולוגיה לתופעות לוואי, גרסה חמישית (CTCAE V5.0). בדיקות, כולל תגובות שמיעתיות קבועות (ASSR), ABR ופליטת אוטו-אקוסטית (DPOAE) של תוצר עיוות, העריכו את תפקוד השמיעה של המטופלים, לוקליזציה של מקור הקול ותפיסות דיבור.
החוקרים ניתחו את סולם האינטגרציה השמיעתית המשמעותית (MAIS) או IT-MAIS, קטגוריות ביצועים שמיעתיים (CAP) וציוני השימוש המשמעותי בסולם הדיבור (MUSS).
הם העריכו את תפיסת הדיבור באמצעות דירוג הבנת הדיבור (SIR) ויכולת לוקליזציה של מקור הצליל תוך שימוש בסולם המרחב והאיכויות האחרות של שמיעה להורים (SSQ-P).
החוקרים העניקו דקסמתזון לווריד במשך שמונה ימים, החל שלושה ימים לפני ההזרקה הדו-צדדית AAV1-hOTOF כדי להפחית את הדלקת. הם חקרו את מבנה האוזן באמצעות טומוגרפיה ממוחשבת (CT) והדמיית תהודה מגנטית (MRI).
הם ניתחו את ממצאי רצף Sanger ופירשו גרסאות OTOF. הם ביצעו רצף של אקסום שלם כדי לגנוטיפ את הדגימות. הם דגמו דם מהמשתתפים כדי למדוד טיטר נוגדנים מנטרלים נגד AAV1. תגובות אינטרפרון-גמא (IFN-γ) נקודת אימונוסורבנטית מקושרת אנזים (ELISpot) ל-AAV1 הצביעו על תגובות של תאי T במחזור הדם.
תוצאות
המשתתפים לא פיתחו תגובות רעילות מגבילות מינון או תופעות לוואי חמורות. החוקרים מצאו 36 תופעות לוואי, בדרגה 1 או 2, השכיחות ביותר הן ספירת לימפוציטים מוגברת (שישה מתוך 36) ורמות כולסטרול (שש מתוך 36).
הם הבחינו באנטומיה רגילה של האוזן לאחר ההזרקה. כל החולים קיבלו שיקום שמיעה דו צדדי. בקו הבסיס, ה-ABR הממוצע לאוזן ימין (שמאלית) עלה על 95 דציבלים.
לאחר 26 שבועות, החתך חזר ל-58 דציבלים (58 דציבלים) בחולה הראשון, 75 דציבלים (85 דציבלים) בחולה השני, 55 דציבלים (50 דציבלים) בחולה השלישי, 75 דציבלים (78 דציבלים) ברביעי חולה, ו-63 דציבלים (63 דציבלים) בחולה החמישי.
לאחר 13 שבועות של טיפול, ספי ABR הממוצעים בחמישה חולים שקיבלו טיפול בינאורלי היו 69 dB. בחמישה חולים שקיבלו טיפול חד צדדי, הם עלו על 64 דציבלים. ספי ASSR הממוצעים היו 60 dB עבור חולי ריפוי גנטי דו-צדדי ו-67 דציבלים עבור חולים חד-צדדיים שטופלו ב-1.50 × 1012 vg AAV1-hOTOF.
לכל חמשת המטופלים שוחזרו תפיסת הדיבור שלהם ויכולת לוקליזציה של מקורות קול. הצוות מצא שציוני MAIS, IT-MAIS, CAP או MUSS השתפרו בכל החולים.
שישה שבועות לאחר הטיפול, כל החולים פיתחו נוגדנים מנטרלים AAV1. טיטר נוגדנים מנטרלים בקרב מקבלי ריפוי גנטי דו-צדדי היו 1:1,215, ובקרב אלו שקיבלו מינון חד-צדדי, הטיטרים נעו בין 1:135-1:3,645.
הממצאים הצביעו על כך שלקבוצת ההזרקה הדו-צדדית היו יותר נוגדנים מנטרלים. שבוע לאחר הטיפול, אף דם של חולה לא נבדק חיובי לחומצה וקטורית דאוקסיריבונוקלאית (DNA). שישה שבועות לאחר טיפול גנטי בינאורלי AAV1-hOTOF, תגובות IFN-γ ELISpot למאגרי פפטיד קפסיד AAV1 היו שליליות.
סיכום
בהתבסס על ממצאי המחקר, טיפול גנטי בינאורלי מסוג AAV1-hOTOF הוא ריאלי, בטוח ויעיל עבור חולי DFNB9. תוצאות המחקר מרחיבות את אפשרויות הטיפול ומעודדות טיפול גנטי לחירשות תורשתית הנגרמת על ידי גנים שונים.
