רקע ומטרות
הקפסולה של Huo Xue Tong Luo (HXTL) שימשה קלינית לטיפול באוסטאונקרוזיס של ראש הירך, אוסטאופורוזיס ומחלות עצם ומפרקים אחרות עם השפעות מבטיחות. המחקר הקודם שלנו הראה כי HXTL יכול לקדם אוסטאוגנזה בתאי גזע מזנכימליים על ידי עיכוב ביטוי lncRNA-miat באמצעות שינויים בהיסטון. עם זאת, המנגנון שבאמצעותו HXTL מטפל באוסטאופורוזיס לאחר גיל המעבר (PMOP) נותר לא ברור. במחקר זה השתמשנו בחיזוי מנגנון מבוסס פרמקולוגיה ברשת, עגינה מולקולרית ואימות פרמקולוגי כדי לחקור את המנגנון של HXTL בטיפול ב- PMOP.
שיטות
יעדי המועמדים העיקריים ומסלולי איתות רלוונטיים של HXTL לטיפול ב- PMOP ניבאו באמצעות פרמקולוגיה של רשת וניתוח עגינה מולקולרית. תאים RAW264.7 שימשו לכתם מערבי כדי לאמת את המסלולים המכניסטיים החזויים. שחלות העכברים הוסרו בניתוח כדי לדמות PMOP. ההשפעה של HXTL על PMOP הוערכה באמצעות מכתים פוספטאזים חומצה עמידה לטטרטראט ומבחני אימונוהיסטוכימיה in vivoו
תוצאות
ניתוח פרמקולוגיית רשת הציע כי HXTL בינה אינטראקציה עם 215 יעדי מפתח הקשורים ל- PMOP, מה שהשפיע בעיקר על מסלול האיתות PI3K-AKT. עגינה מולקולרית הראתה כי המרכיבים העיקריים של HXTL הראו זיקה מחייבת חזקה ל- NFATC1, P-PI3K ו- P-AKT1. יתר על כן, שלנו ב חוץ גופית התוצאות אישרו כי HXTL דיכא את מסלול האיתות PI3K-AKT. In vivoהוא ותוצאות הכתמת פוספטאז עמידות בפני חומצה עמידות לטטרטראט הראו כי HXTL עיכבו את היווצרות האוסטאוקלסט ואת מסת העצם המוגנת.
מסקנות
מחקר זה הדגים כי HXTL יכול לעכב היווצרות אוסטאוקלסט ולמנוע אובדן עצם הנגרם על ידי כריתת השחלות בעכברים על ידי עיכוב מסלול האיתות PI3K-AKT. ממצאים אלה מספקים עדויות חשובות ליישום הקליני של HXTL בטיפול ב- PMOP.
