חוקרים חושפים חיסון דנ"א פורץ דרך שמגביר את החסינות ומגביר את ההישרדות בחולים עם סרטן שד אגרסיבי – האם זה יכול להיות העתיד של טיפול מותאם אישית בסרטן?
מחקר: חיסוני DNA של ניאואנטיגן הם בטוחים, אפשריים ומעוררים תגובות חיסוניות ספציפיות לניאואנטיגן בחולות סרטן שד משולש שליליות. קרדיט תמונה: Nemes Laszlo / Shutterstock
במחקר שפורסם לאחרונה בכתב העת רפואת הגנוםחוקרים בארצות הברית של אמריקה פיתחו פלטפורמת חיסון דיאו-אנטיגן דיאוקסיריבונוקלאית (DNA) וערכו ניסוי קליני שלב 1 כדי להעריך את הבטיחות והתגובה החיסונית שלה בחולים עם סיכון גבוה לסרטן שד משולש-שלילי (TNBC). הם מצאו שהחיסון נסבל היטב, גרם לתגובות של תאי T ספציפיים לניאו-אנטיגן ב-78% מהחולים, והראה שיעור הישרדות מבטיח ללא הישנות של 87.5% במשך 36 חודשים, בהשוואה ל-49% בביקורות היסטוריות.
רֶקַע
חלבונים מוטנטים המובעים מגידולים שניתן לזהות על ידי המערכת החיסונית, הנקראים ניאו-אנטיגנים של סרטן, הם יעדים מבטיחים לטיפול אימונותרפי. ההתקדמות בריצוף הסרטן וביואינפורמטיקה אפשרה את הזיהוי של ניאו-אנטיגנים אלו, מה שהוביל לפיתוח חיסונים הממריצים תגובות של תאי T ספציפיים לניאו-אנטיגן וחסינות נגד גידולים. מחקרים ראשוניים הדגימו את היעילות של חיסוני ניאו-אנטיגן במודלים פרה-קליניים ומלנומה אנושית באמצעות פלטפורמות שונות, כולל תאים דנדריטים, פפטיד ארוך סינתטי (SLP) וחיסוני חומצה ריבונוקלאית (RNA). בעוד שגישות אלה הוכיחו הבטחה, פלטפורמת חיסוני ה-DNA מציעה יתרונות ייחודיים, כולל גמישות עיצובית, עלות נמוכה יותר והיכולת לכלול מספר ניאו-אנטיגנים במבנה אחד.
חיסוני Neoantigen הוערכו גם בגליובלסטומה, סרטן הלבלב וגידולים ממאירים אחרים, והוכחו בטוחים ואימונוגניים בניסויים מוקדמים. ל-TNBC חסרים טיפולים ממוקדים והוא קשור לעומס מוטציות גבוה ולשפע לימפוציטים חודרים לגידולים (TILs), המתואמים עם תוצאות טובות יותר. תכונות אלו הופכות את TNBC למועמד אידיאלי לטיפול בחיסון ניאואנטיגן. למרות פוטנציאל זה, עד למחקר זה לא דווח על מחקרים על חיסון DNA של ניאו-אנטיגן בסרטן השד. במחקר הנוכחי, חוקרים פיתחו פלטפורמת חיסון DNA ניאו-אנטיגן משופרת באמצעות אלקטרופורציה לשיפור האימונוגניות. הם חקרו את השפעותיו באמצעות ניסוי קליני שלב 1 בחולים עם TNBC מתמשך לאחר כימותרפיה.
על המחקר
סך של 35 מטופלים עם TNBC מתמשך בעקבות כימותרפיה ניאו-אדג'ובנטית וללא סרטן גרורתי או הפרעות אוטואימוניות נרשמו בין השנים 2015 ו-2018. ביופסיות גידולים ותאי דם היקפיים מונו-גרעיניים (PBMCs) תואמים נאספו עבור רצף גידול נורמאלי של מוטציות וריצוף ניאו-דקטנטיגנים. . ניאואנטיגנים זוהו באמצעות צינור pVACtools, אשר העניק עדיפות לפפטידים על סמך מאפייני זיקה, ביטוי ומוטציה. חיסוני DNA תוכננו לכוון לניאו אנטיגנים עם עדיפות, תוך שילוב רצף יוביקוויטין מוטנטי כדי לשפר את הצגת האנטיגן. מבחני הקלדה ואימות של אנטיגן לויקוציטים אנושיים (HLA) הבטיחו מיקוד מדויק לאפיטופים. כל חיסון עבר בקרת איכות קפדנית, מה שמבטיח סטריליות ויכולת ביטוי.
17 נבדקים לא נכללו בטיפול עקב תגובה פתולוגית מלאה, קרצינומה ductal in situ, רקמת גידול לא מספקת, העדפת המטופל או הישנות המחלה. 18 חולים קיבלו את החיסון, כשהם מכוונים לחציון של 10 ניאו אנטיגנים (4-20) לאחר השלמת טיפול אדג'ובנטי סטנדרטי. החיסון (4 מ"ג) ניתן תוך-שרירי באמצעות מכשיר האלקטרופורציה TriGrid בימים 1, 29 ו-57. כדי למדוד תגובות של תאי T, נשאב דם היקפי להערכות אימונולוגיות, כולל ELISpot ו-flow cytometry. ניטור הבטיחות כלל הערכות קליניות ומעבדה. הרעילות דורגה לפי קריטריוני הטרמינולוגיה הנפוצים של המכון הלאומי לסרטן (CTCAE). התגובות החיסוניות אושרו באמצעות בדיקת נקודות אימונוסורבנטית מקושרות אנזים, ציטומטריית זרימה וצביעת טטרמר, ואחריה ריצוף קולטני תאי T (TCR) וניתוח קלונוטיפ. ניתוח סטטיסטי כלל שימוש במבחן ה-t של Student, שיטת מגבלת המוצר של קפלן-מאייר ומבחן ה-log-rank.
תכנון, ייצור ומתן חיסוני DNA ניאו-אנטיגן עבור חולי TNBC. א מוטציות סומטיות זוהו על ידי רצף שלם של אקסומים של ה-DNA של הגידול ושל קו הנבט. ביטוי המוטציה אושר על ידי גידול RNA-seq עם לכידת cDNA. ניאו-אנטיגנים מועמדים קיבלו עדיפות להכללה בחיסונים על בסיס תחזיות קישור HLA על ידי pVAC-seq (שיטות). חיסוני DNA של Neoantigen ניתנו תוך שרירית באמצעות מכשיר אלקטרופורציה של TriGrid. דם היקפי נמשך לפני כל נקודת זמן חיסון ובנקודות זמן נבחרות לאחר כל החיסונים כמצוין ב א. ב 35 חולים עם TNBC מתקדם מקומי קיבלו הסכמה. חולים לא נכללו עקב תגובה פתולוגית מלאה לאחר כימותרפיה ניאו-אדג'ובנטית (NAC), גידול לא מספיק, נסיגת חולים והישנות המחלה. 18 חולים קיבלו חיסוני DNA נאואנטיגן מותאמים אישית
תוצאות ודיון
נמצא חציון של 21.5 מוטציות סומטיות לחולה, שמונה מהן הובילו לזיהוי של ניאו אנטיגנים מועמדים. רוב המוטציות הללו היו מוטציות מיסנס, כאשר מוטציות TP53 היו נפוצות. הכללת ניאו אנטיגנים הקשורים ל-TP53 מדגישה את הפוטנציאל של מיקוד למוטציות נהגים נפוצות ב-TNBC. החיסונים כללו חציון של 10 ניאו אנטיגנים, נע בין 4 ל-20 לחולה.
45 מתוך 47 ניאו אנטיגנים שגרמו לתגובה ראשונית אושרו כאימונוגניים. בסך הכל 14 חולים הראו תגובה לניאו-אנטיגן אחד לפחות, כאשר 23% מ-198 הניאו-אנטיגן הכוללים היו אימונוגניים. לאחר החיסון, נצפתה עלייה ניכרת במספר התאים היוצרים כתמים (SFCs) בחולים, מה שמעיד על תגובה חיסונית מורחבת ספציפית לניאו-אנטיגן. ניתוח ציטומטריית זרימה חשף תגובות של תאי T CD8 ו-CD4 לניאו-אנטיגנים. התרחבות של TCRs ספציפיים לניאו-אנטיגן בעקבות חיסון אושרה עוד יותר, כאשר חלק מהניאו-אנטיגנים הראו תגובות חד שבטיות ואחרים הדגימו התרחבות אוליגוקלונלית.
התוצאות הקליניות הוערכו על ידי השוואת הישרדות ללא הישנות (RFS) בחולים מחוסנים לביקורות היסטוריות של TNBC. לאחר 36 חודשים, לחולים מחוסנים היה RFS של 87.5%, גבוה משמעותית מ-49% שנצפו בקבוצת הביקורת (P = 0.011). החיסון נסבל היטב, עם אירוע דרגה 3 אחד (יתר לחץ דם) ו-13 אירועים דרגה 2 (כאבים באתר ההזרקה), יחד עם מיאלגיה קלה (דרגה 1).
בסך הכל, המחקר מצביע על כך שחיסוני DNA מותאמים אישית של ניאו-אנטיגן הם אפשריים, נסבלים היטב ומסוגלים לגרום לתגובות חיסוניות חזקות ולשפר את התוצאות הקליניות בחולי TNBC. למרות שהניסוי לא היה אקראי ולהשוואות לבקרות היסטוריות יש מגבלות, השיפורים שנצפו ב-RFS תומכים מאוד בחקירה נוספת של גישה זו.
מַסְקָנָה
לסיכום, גישת פלטפורמת חיסוני ה-DNA הניאואנטיגן מציעה אסטרטגיית אימונותרפיה מבטיחה, מותאמת אישית, שניתן להרחיב גם לסוגי סרטן אחרים עם עומס מוטציות נמוך, מה שעלול לשפר את התוצאות במחלות ממאירות קשות לטיפול. מחקרים עתידיים המשלבים חיסונים אלה עם מעכבי נקודת ביקורת חיסונית עשויים לשפר עוד יותר את היעילות הטיפולית.
