גליקוזילציה של חלבון היא תהליך ביולוגי בסיסי המווסת תפקודים תאיים שונים, אך המחקר שלו נבלם על ידי המורכבות והשפע הנמוך של גליקופרוטאין. במחקר פורץ דרך שפורסם ב סקירת המדע הלאומימדענים מאוניברסיטת פודן פיתחו אסטרטגיית העשרת גליקופפטידים מבוססת קשירה כימית בשם HG-TCs. שיטה זו משתמשת בחומרים מתקדמים בשלב מוצק ובכימיה ביואורתוגונלית כדי לזהות בו זמנית סוגי גליקוזילציה מרובים, כולל N-glycosites, O-GlcNAc ואתרי O-GalNAc, כמו גם N-glycans (ראה תמונה למטה). לאסטרטגיית HG-TCs יש את היכולת להעשיר גליקופפטידים באמצעות תגובת אזיד-אלקין cycloaddition ולשחרר אותם באמצעות מחשוף טריפסין. זרימת עבודה זו של צינור אחד ממזער אובדן דגימה תוך שמירה על יכולת שחזור גבוהה.
הגישה מציעה זרימת עבודה יעילה בזמן עם מדרגיות יוצאת דופן, מזהה למעלה מ-900 אתרי O-GlcNAc ו-800 N-glycosites בתאי HeLa בניסוי יחיד, תוך שימוש בכמויות דגימה מינימליות. הצוות ציין זאת "אפילו בין השכפולים הטכניים, הבטחת תוצאות זהות נותרה מאתגרת. לכן, בניתוח מקיף, מיפוי של גליקוזילציות מרובות בנפרד עשוי להציג וריאציות תפעוליות וטכניות שמובילות לנתונים לא עקביים, במיוחד עבור מודלים או מערכות ביולוגיות דינמיות ומורכבות מסוימות."אז,"HG-TCs תורמים מאוד לחקר מערכת פחמימות דינמית ומורכבת ביותר, המאפשרים לא רק מיפוי של מספר גליקוזילציות אלא גם ניטור בו-זמני של שינויים מרובים בגליקוזילציה."
צוות המחקר גם יישם אסטרטגיה זו כדי לנתח דגימות תאי HeLa תחת לחץ חמצוני. הם חשפו דפוסי גליקוזילציה מרחביים ברורים בין הגרעין לציטופלזמה, והציעו תובנות חשובות לגבי התפקידים הדינמיים של הגליקוזילציה בתגובות התאיות. מחקר זה מספק כלי חזק למחקר גליקופרוטאומי, המסייע בהבנת התפקידים הדינמיים של הגליקוזילציה במנגנוני איתות תאית ומנגנוני מחלות. עבור חוקרים ב-glycoproteomics, שיטה זו מייצגת קפיצת מדרגה משמעותית, המפשטת זרימות עבודה מורכבות תוך שמירה על איכות נתונים גבוהה. הממצאים רלוונטיים במיוחד לחקר שינויים בגליקוזילציה בסרטן ובמחלות אחרות.
